Outils cellulaires pour l’élucidation de la signalisation GPR75 et l’identification des modulateurs GPR75

Le récepteur GPR75 apparaît comme une cible potentielle pour les maladies métaboliques, mais l’incohérence des résultats concernant l’activité de ses ligands a freiné les progrès. Chez Sygnature Discovery, nous avons développé une série de tests fonctionnels cellulaires pour caractériser la signalisation de GPR75 et identifier avec certitude ses modulateurs.

En utilisant des systèmes cellulaires HEK inductibles, nous avons démontré une activité constitutive par des tests de rapporteur CRE et de recrutement de la β-arrestine, révélant des relations inverses entre les signaux cAMP et β-arrestine. Des mesures orthogonales, incluant la dissociation de la protéine G et l’expression de surface marquée HiBiT, ont confirmé les préférences de couplage pour les voies Gαi3 et Gαq. Ces tests ont été optimisés pour le criblage à haut débit en formats 96 et 384 puits, avec des fenêtres de dosage robustes et des facteurs Z reproductibles, offrant ainsi une plateforme performante pour la découverte d’agonistes, d’agonistes inverses et de biais pour ce récepteur orphelin.