Caractérisation électrophysiologique des effets fonctionnels et pharmacologiques des variants codants lysosomaux de type sauvage, à gain de fonction et à perte de fonction de TMEM175

TMEM175 est un canal ionique lysosomal activé par les protons qui régule le pH lysosomal et l’autophagie. Des mutations de ce canal ont été associées au risque de maladie de Parkinson. Sygnature Discovery a développé des lignées cellulaires HEK-293 recombinantes exprimant la forme sauvage (WT) et des variants à gain de fonction (GoF) et à perte de fonction (LoF) de TMEM175 afin d’étudier la conductance aux protons et au césium à l’aide de la plateforme d’électrophysiologie automatisée SycroPatch 384i. La caractérisation électrophysiologique a porté sur la sensibilité au pH, les courants activés par les protons et le césium, ainsi que sur la modulation pharmacologique à l’aide d’un activateur (DCPIB) et d’un inhibiteur (4-AP) connus. Les résultats ont révélé les réponses attendues du canal en fonction du pH, des variations de sensibilité spécifiques aux variants et des changements significatifs de puissance selon le pH. Ce test à haut débit permet un profilage rapide des modulateurs de TMEM175 et fournit une plateforme translationnelle pour explorer le rôle de la fonction des canaux ioniques lysosomaux dans la maladie de Parkinson.